Время чтения статьи: 1 минут(ы)

 Мой блог  на сайте

• Лечение бесплодных Коровы: Эффективность PGF 2 и гентамицин или их комбинации в PRID режима
• Воспроизводство крс
• Скрещивание системы в крупного рогатого скота
• Гарантии – Производительность
• Молочные Скрещивание: результаты новых исследований и информации еще необходимо
• Краткое изложение некоторых генетических принципах
• Скрещивание Программы для крупного рогатого скота во Флориде
• Как Генетика определяет систему, или же система определяет генетика?
• Генетическое улучшение Молочные коровы долголетие
• Генетика молочный скот

Р. Феррандо
Директор Лаборатории питания и питания
Национальная ветеринарная школа Альфора
94704 Maisons-Alfort (Франция)

1. ВВЕДЕНИЕ

Вопрос об использовании в животноводстве анаболических агентов, включая природные стероидные гормоны и их производные, ставился и продолжает ставиться плохо и, следовательно, неправильно понят. Те, кто представил проблему общественности, не обладали ни информацией, ни технической компетенцией, особенно в области биологии, чтобы говорить с полной объективностью.

Гормоны естественным образом содержатся во многих продуктах животного происхождения (6, 7) и, в качестве фитогормонов, во многих растениях (3, 5). Лишь некоторые из них вызывают проблемы общественного здравоохранения, и их следует отличать от остальных. Действительно, изучение практических и медицинских аспектов использования гормонов в животноводстве должно лежать в основе всего регулирования этого вопроса и, следовательно, любого решения об измерении уровней гормонов.

Существует значительный объем документации по проблеме (6), которая так же важна как для развитых, так и для развивающихся стран. Пункты с 1 по 11 в библиографии этой статьи указывают на ряд общих исследований.

2. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГОРМОНОВ В ЖИВОТНОВОДСТВЕ И ЕГО ПОСЛЕДСТВИЯ

Чтение многих популярных и даже официальных статей показывает, что различные типы анаболических агентов, независимо от их структуры, группируются под общим названием гормонов, среди них те, чья активность как эстрогенов подчеркивается, и те, которые усиливают мужские черты.

Опубликованные материалы и результаты исследований позволяют выделить три типа анаболиков.

К первому типу относятся вещества, не встречающиеся у млекопитающих и птиц, а полученные исключительно путем органического синтеза: диэтилстилбоэстрол (ДЭС) или стильбоэстрол, диеноэстрол, гексоэстрол и их производные. Эти соединения, активные при пероральном введении или в виде имплантатов, вредны для лабораторных животных независимо от того, вводятся ли они непосредственно или в виде остатков в мясе и субпродуктах обработанных животных. Использование этих веществ, представляющих потенциальную опасность для здоровья человека, запрещено во многих странах, тем более что методы измерения уровня ДЭС в мясе ненадежны, поэтому измерения необходимо проводить на экскрементах.

Второй тип анаболиков состоит из естественных стероидов, в норме присутствующих у всех животных: тестостерона, эстрадиола, эстрона, прогестерона. Эти вещества и их производные, секретируемые железами внутренней секреции, хотя и всасываются в кишечнике, дезактивируются в печени. Они производят измеримые эффекты только при имплантации.

Третий тип, встречающийся у высших растений и плесеней, состоит из веществ с более или менее выраженной эстрогенной, а иногда и анаболической активностью. Среди этих фитоэстрогенов для использования в животноводстве выделен только зеараленон: как и зеранол, он дает хорошие результаты, но влияет на формирование половых органов и уровень тироксина в плазме (23). Следует добавить, что Sharaf и Gomaa (21) приписывают эстрогенные эффекты витаминам E, B ₆ , C и, возможно, A, в то время как Nelson et al . (20) изучали те же эффекты в Оп’-ДДТ.

В данной статье обсуждаются только последствия для потребителя использования в животноводстве первых двух типов: синтетических препаратов, таких как ДЭС, и природных стероидов эстрадиола, прогестерона и тестостерона.

В первую очередь следует упомянуть о случаях рака влагалища и гипогонадизма, наблюдаемых у потомства женщин, получавших СЛП. Такие наблюдения (17, 18, 22) подтверждаются исследованиями, основанными на так называемой эстафетной методологии (13), основанной на том факте, что методы анализа остатка и его метаболитов не отражают практических реалий, поскольку могут привести к обнаружение остатков без биодоступности или наоборот. Кроме того, индивидуальная биологическая оценка каждого метаболита не отражает общего потребления их всех. Реле, животное фермы, меняет эту ситуацию.

Чтобы определить, верно ли это для первых двух типов анаболических агентов, крысы и мыши обоего пола получали (13) сбалансированную диету, содержащую 20 % мяса или 6 % печени телят мужского и женского пола, которым имплантировали DES (13). 24 мг в каждом из двух имплантатов), эстрадиол и прогестерон (20 + 200 мг в два приема) или эстрадиол + тестостерон (20 + 200 мг в два приема). Животным имплантировали в начале периода роста и через 60 дней, за 38 дней до убоя.

Химическое измерение остатков показало, что уровни DES составляют 30 г/кг в мясе, но не в печени. Уровни естественных стероидных гормонов не превышали уровней у нелеченых животных.

Кормление крыс и мышей мясом телят с имплантированным DES приводило к росту обоих полов, стерилизовало самок и резко атрофировало яички, семенные протоки и половой член самцов (12, 15). Поведение печени было менее отчетливым. Покровский и др . . и Нестерин (2) получили аналогичные результаты с мясом. Также было замечено, что DES сохраняется в окружающей среде почти 40 дней и обнаруживается в люцерне (5, 14).

Животные, которых кормили мясом и печенью телят, которым имплантировали эстрадиол + прогестерон или эстрадиол + тестостерон, вели себя так же, как и контрольные животные, которых кормили мясом и печенью контрольных телят. Через 24 мес процент опухолей (преимущественно аденомы молочной железы, частой у старых крыс Вистар) был одинаковым в обеих группах.

Тренболона ацетат (TBA), производное тестостерона, практически не оставляет следов. Измерено с помощью радиоиммуноанализа, Gropp et al . (16) также изучали их биологические эффекты методом эстафетной токсичности на крысах Sprague-Dawley, которых кормили мясом телят, которым имплантировали смесь 20 мг эстрадиола-17β + 140 мг ТБК, а также дозы в 10 и 25 раз выше . Результаты этого исследования, продолжавшегося 110 недель и охватившего два поколения, показали отсутствие какого-либо неблагоприятного влияния на рост, массу органов, репродукцию, тератогенность и канцерогенность. Только самки, питавшиеся мясом контрольных телят, которым добавляли ТВА в дозах, в 25 раз превышающих норму, имели значительно более низкий рост (P<0,05). Биохимические константы в крови были одинаковыми в обеих группах.

Эти эксперименты показывают, что соединения природных стероидных мужских и женских гормонов и их производные не представляют опасности для потребителя. Они полезны в животноводстве, поскольку позволяют избежать ряда дорогостоящих и загрязняющих окружающую среду терапевтических операций. Наоборот, применение нестероидных анаболиков типа DES имеет серьезные недостатки. Их остатки в мясе трудно обнаружить. Результаты эстафетной токсичности показывают, что анализы и биологическое поведение не согласуются.

Неизбирательный запрет всех типов анаболических агентов может привести к использованию DES и подобных веществ. Анализы мочи, в которых их легче всего выявить, выявили их в 20% случаев. По оценкам McClung (19), в Соединенных Штатах 500 000 голов крупного рогатого скота подвергаются незаконному лечению. В Европе незаконное использование, по-видимому, является довольно распространенным явлением, но имеет тенденцию к сокращению. Таким образом, использование DES и подобных веществ должно быть запрещено, а использование стероидов и их производных должно быть разрешено под ветеринарным контролем. Таково было мнение многих авторов еще в 1967 г., и их выводы были подтверждены Объединенным комитетом ФАО/ВОЗ в 1975 г. (2) и недавним международным симпозиумом (Варшава, 27–30 апреля 1980 г.) (9). Любой новый анаболический агент должен быть тщательно протестирован, прежде чем он будет широко распространен.

Необходимо разработать практичные, экономичные и быстрые, но очень точные методы обнаружения остаточных количеств, особенно тех, которые образуются в продуктах, химически отличающихся от природных стероидных гормонов и их производных.

3. МЕТОДЫ ИЗМЕРЕНИЯ УРОВНЯ ГОРМОНОВ В ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОГО ПРОДУКТА

Следует четко понимать, что это обсуждение касается только методов измерения, предназначенных для обнаружения остатков, остающихся в мясе и внутренностях. Эти методы, однако, не очень надежны, и необходимо исследовать другой биологический материал, чтобы определить, лечились ли животные. Специалисты сходятся во мнении, что по-прежнему существуют трудности с тестированием остатков в тканях животных, предназначенных для использования в пищу.

На уровне ЕЭК было предложено и обсуждено множество различных методов. Хотя тенденция к использованию радиоиммуноанализа все больше возрастает, нельзя отрицать, что методы очень сложны и еще далеки от совершенства.

ДЭС и подобные вещества желательно искать в моче и фекалиях. Инструкции на этот счет были изданы в США в 1979 г. и утверждены в 1980 г. (48).

Следует также учитывать тот факт, что между животными, правильно имплантированными анаболическими агентами, и животными, не получавшими лечения, не может быть обнаружено никакой разницы. Этой проблеме уделялось недостаточно внимания. Материалы Совместного совещания ФАО/ВОЗ в марте 1975 г. (2) содержат отчеты, подчеркивающие отсутствие различий и относительно высокие, но физиологические уровни тестостерона и прогестерона в мясе быков и беременных коров соответственно. В таком случае, как отличить естественное присутствие этих веществ от их присутствия благодаря использованию натуральных продуктов?

Кроме того, не следует забывать, что очень многие корма для животных содержат фитогормоны, которые могут вызывать изменения в морфологии и гистологии некоторых органов.

После обобщения и изложения принципов четырех основных групп полезных методов, перечисленных Kroes et al . (39) и Richou-Bac и Pantaléon (42) — гистологические, биологические, физико-химические и радиоиммунологические методы анализа — в этой статье подробно изучаются методы, которые можно применять на практике для рутинного контроля.

1. Гистологические методы (Kroes et al.. (39)), применяемые специально на молодняке крупного рогатого скота, заключаются в наблюдении модификаций мужских и женских гениталий. У самцов телят и ягнят особенно исследуют предстательную железу и бульбо-уретральные железы, тогда как у самок внимание сосредоточено на бартолиновых железах, сосках, влагалище и шейке матки. Изменения очевидны при использовании DES и зеранола, а также гексоэстрола. У свиней эффекты менее заметны. Принято считать, что гистологический метод позволяет заключить, что эстроген применялся в более раннее время. Использование натуральных стероидных эстрогенов в сочетании с тестостероном или прогестероном приводит лишь к незначительным гистологическим изменениям. Фитоэстрогены также могут иметь некоторый эффект и приводить к модификациям; это случай зараженной фузариозом кукурузы.
2. В качестве биологических методов используются методы Astwood (26), которые измеряют увеличение массы матки у препубертатных мышей и крыс, и Allen and Doisy (25), основанные на модификации цитологии влагалища взрослых мышей после оварэктомии. . Последний тест, примененный Stob et al . (47) в 1954 г., является наиболее чувствительным, но реагирует только на соединения с эстрогенной активностью. Мартин (40) сообщает, что использование концентрированных экстрактов, помещенных во влагалище мышей, также дает хорошие результаты.
3. Физико-химические методы , позволяющие с точностью идентифицировать искомый анаболический агент, требуют достаточно длительной экстракции с последующей тонкослойной или газофазной хроматографией. Ганс и Абрахам (31) сообщают, что последние методы в сочетании с масс-спектрометрией уже можно рассматривать. Чувствительность высокая. Далее возможно использование жидкостной хроматографии. В настоящее время используется тонкослойная хроматография, и Вербеке подробно описывает этот метод в документе ЕЕС (50), а Вальдшмидт (52) и Шуллер и Стефани (46) описали этот метод.
4. Радиоиммуноанализ , впервые описанный для эстрогенных стероидов Jiang и Ryan (38), основан на конкуренции между мечеными тритием и немечеными антигенами за соответствующие специфические антитела. Этот метод, который используется все чаще, обладает высокой чувствительностью, позволяя обнаруживать от 0,05 до 0,005 частей на миллиард DES и 0,1 частей на миллиард TBA. Он, однако, сложный и длительный, хотя и совершенствуется. Он имеет те же преимущества, что и все виды использования радиоактивных соединений. Эта техника была хорошо изучена Хоффманном (34) и Хоффманном и Каргом (35).

Можно также упомянуть два новых метода: жидкостную хроматографию высокого давления, которая, согласно Richou-Bac и Pantaléon (42), не является достаточно чувствительной, и так называемый метод Elisa, примененный Ruitenberg et al . (44) в Нидерландах для выявления заражения свиней Trichinella Spiralis . Этот метод, который использует фермент для мечения с последующим измерением с помощью спектрофотометрии 450 нм, нуждается в дальнейшей разработке, но его использование можно автоматизировать. Крез, работающий в Билтховене (Нидерланды), изучает, как его можно использовать для измерения уровня гормонов.

Таблица I, составленная из оригинала, любезно предоставленного Ришу-Бак, показывает чувствительность всех этих новых методов.

ТАБЛИЦА I. Чувствительность методов тестирования
на «гормоны» и анаболические агенты
(млрд)

вещество	Радиоиммуноанализ				Тонкослойная хроматография			биологический		Другой
	мышцы	Печень	Моча	Плазма	Мясо	Моча	Кал	Аствуд	Гистология (простата)
ДЕС	0,05–0,09	0,05–0,09		0,2	от 0,5 до 20	6	10	5 (устно)	+ + + +	Высокое давление
гексоэстрол	0,04			0,03	от 0,5 до 80			–	+ + +	жидкостная хроматография
Диеноэстрол	–	–		–	от 0,5 до 40			–	+ +	Метод Элизы
Этинилэстрадиол	–	–		0,02	от 4 до 40			5	+ + + +
Зеранол					от 3 до 80			+ (подкожный)	+ + + +
зеараленон					3
Эстрадиол-17β	<0,05	<0,05	0,1	0,02	1	10		20	+ +
Эстрадиол-17α	–	–		0,02	0,5	10		?	?
Эстроне	≤0,5	≤0,5		0,02	2			40	+
эстриол	от 0,05 до 1	от 0,05 до 1		–
Эстрадиол-17β
+ прогестерон
									+ +
прогестерон	?	?		0,05
					(от 1 до 10
Медрокси-прогестерон
α или β-метил
прогестерон					от 2 до 10
Тестостерон	?	?	≤0,02	≤0,02	от 2 до 8
19-нортестостерон				0,02
Метил тестостерон				–	от 0,5 до 4
Тренболон	0,1	0,1		0,02	от 0,2 до 10
Тренболон + эстрадиол-17β									+
1–6 или 5 Дегидротестостерон	0	0			от 1 до 3

 

Рисунок А	Рисунок Б
Источник : Вербеке (50)	Источник : Вербеке (49)

Рисунок С

МОЧА

(образец: 20 мл, разбавлен 10 мл H ₂ O)
↓
Гидролиз
↓
Эфирная экстракция и промывка эфирной фазы
↓
Колонка с силикагелем
↓
Элюат выпаривают в атмосфере азота
и собирают в мкл ацетона
↓
ВЭТСХ (двукратно) *
↓
Наблюдение в УФ 366 нм
(розовое пятно указывает на присутствие DES)

Источник : Ветеринарная служба Франции.

* Высокоэффективная тонкослойная хроматография (двумерная).

На практике наиболее актуальной проблемой является обнаружение DES. Бори и др . . (27) и другие авторы показали, что он выводится с мочой и фекалиями. Также было продемонстрировано (30), что слюна не содержит DES, но содержит прогестерон. DES не может быть обнаружен в мясе животных, обработанных за три недели до убоя. Его можно обнаружить в моче через месяц с помощью тонкослойной хроматографии и радиоиммуноанализа.

Для применения метода тонкослойной хроматографии мочевой пузырь должен содержать от 20 до 50 мл мочи. Метод, использованный в 1973 г. (29) для обнаружения остатков эстрадиола, был модифицирован и улучшен Вербеке (50) в 1979 г. Фогт и Эрле (51) использовали его для обнаружения остатков стероидных эстрогенов и стильбена в моче телят. Райан и Хоффманн (22) используют его вместе с радиоиммуноанализом для изучения связанных остатков тренболона.

Для последнего соединения, согласно Richou-Bac и Pantaléon (42), Schuller и Stephany считают возможным использовать тонкослойную хроматографию для достижения уровня чувствительности 0,005 ppb, сравнимого с таковым для радиоиммуноанализа; этот показатель не был включен в Таблицу I.

На рисунках А и В показаны, соответственно, схемы аналитических методов Вербеке для мяса, жира и внутренностей и для мочи (49, 50). На рисунке C показана схема метода анализа мочи, используемого в лабораториях ветеринарных служб Франции для обнаружения DES.

Радиоиммуноанализ основан на конкуренции между мечеными и немечеными антигенами, т.е. меченым гормоном (обозначенным ниже Н*) и немеченым гормоном (Н) за одну и ту же молекулу антитела. На схеме ниже показан процесс реакции.

H* (гормон, меченный тритием)

+

AB (специфическое антитело)

H* – AB (локализованный меченый гормон)

+
        (Стандартный или
H* (биологический

(Меченый тритием гормон)

(Локализованный немеченый гормон)

Поскольку уровни АВ и Н* постоянны, любое увеличение Н вызывает снижение содержания меченого гормона, локализованного в специфическом антителе (Н* – АВ). Измерение, установленное расчетом отношения

зависит от измерения уровней радиоактивности между локализованным меченым гормоном и свободным гормоном.

Крус и др . . (39) и Richou-Bac и Pantaléon (42) подробно рассказали о методах извлечения и измерения. Hoffmann и Laschuetza (37) использовали этот метод для исследования плазмы крови и плоти на наличие DES.

Гормон становится антигенным за счет локализации на сывороточном белке. Маркировка гормона ни в коем случае не должна изменять молекулу. Специфичность иммуноанализа зависит от внутренних характеристик антитела и эффективности метода очистки гормонов. Существует множество методов выделения свободного H*, но, по-видимому, чаще всего используется метод иммунопреципитации. Иммунологическое поведение гормона, присутствующего в его матрице, должно быть идентичным эталонному стандарту.

Такие авторы, как Exley et al . (28), Hoffmann and Karg (35) и Heinritzi (32) использовали этот метод для натуральных эстрогенов, Abraham et al . (24) и Rombauts et al . (43) для DES и Pottier et al . (41), Heitzman и Harwood (33) и Hoffmann and Oettel (36) для TBA.

Пока неясно, какие методы являются наиболее точными и экономичными и, следовательно, практичными для крупномасштабного контроля.

Также необходимо определить основной материал, который может быть проверен.

Мясо, жир и внутренности нельзя использовать для DES, которые можно идентифицировать только в моче с чувствительностью около 6 частей на миллиард. Многие анализы могут быть выполнены с помощью тонкослойной хроматографии и радиоиммуноанализа. Французские контрольные службы используют только первый вариант, оценивая стоимость одного анализа в 25 франков (примерно 5 долларов США). Возможность применения техник к плоти находится в стадии изучения, но в этом отношении техники говорят о «химической пытке». Они признают, что рутинный контроль мяса на наличие всех гормонов представляется сложным.

Эти же службы также используют мочу для измерения естественных гормонов, применяя метод Вербеке (50). От мяса не получено никаких результатов, даже для натуральных гормонов, в течение 3 недель после лечения, поскольку уровни слишком низкие. Таким образом, по сравнению с необработанными телятами тонкослойная хроматография не дает никакой информации.

Таблицы с 1 по 4 исх. 50 показаны уровни чувствительности для различных гормонов в зависимости от используемой системы растворителей, определенные Verbeke, а также значения RF и плашечные цвета при УФ-флуоресценции при 366 нм.

Можно сделать вывод, что рутинный контроль во плоти очень сложен во всех случаях, каким бы ни был анаболический агент. Прежде всего, следует избегать использования DES, и для этой цели, используя мочу в качестве основного материала, предпочтение следует отдавать высокоэффективной двумерной тонкослойной хроматографии.

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

1) Colloque international sur l’innocuité des médicaments, Оттава, Канада, июнь 1975 г. 1976 г. Дирекция по охране здоровья. 153 стр. (двуязычный французский-английский).

2) ФАО/ВОЗ. 1976 Анаболические агенты в животноводстве. Симпозиум ФАО/ВОЗ, Рим, март 1975 г. Под ред. ФК Лу и Дж. Рендел. Штутгарт, Г. Тим. 277 стр.

3) Ferrando, R. 1979 Обычные и нетрадиционные продукты. Серия ФАО «Продовольствие и питание» № 2, Рим.

4) Ferrando, R. 1974 Rev. Inst. Элеваж мед. Платит Тропико : 181.

5) Феррандо, Р. Арка Швейцарии, 1978 г. Тирхейлк , 120, 53 и 131.

6) Феррандо, Р., Буассело-Лефевр, Дж. и Ратсимаманга, А.Р., 1960 г., Proc. 5-й междунар. Конгресс Нутр. , Вашингтон

7) Лорейн, Дж. А. и Тревор Белл, Э. 1976 г. Анализы на гормоны и их клиническое применение . Лондон, Нью-Йорк, Черчилль Ливингстон. 692 с.

8) Материалы международного совещания по применению эстрогенов в животноводстве, 19 мая 1972 г. Под ред. Р. Феррандо. Национальная ветеринарная школа Альфора. 79 стр.

9) Стероиды в животноводстве. 1981 Стажер. Симп. Варшава, апрель 1980 г. Варшавский сельскохозяйственный университет.

10) Симпозиум по природным гормонам в пищевых продуктах животного происхождения. 1977 Дж. Аним. науч. 45, 609–685.

11) Use, 1980 Остатки и токсикология стимуляторов роста, Дублин, июнь 1980. An Fórus Talúntais.

12) Феррандо, Р. и Бойвин, Р. 1972 CR Acad. науч. Париж, 274 (серия D), 251.

13) Ferrando, R. & Truhaut, R. 1972 CR Acad. науч. Париж, 275 (серия D), 279.

14) Ferrando, R. & Valette, JP 1976 J. Europ. Токсикол., 9, 335.

15) Феррандо, Р., Валетт, Дж. П., Генри, Николь, Бойвин, Р. и Пароди, А. 1974 CR Acad. науч. Париж, 278 (серия D), 2067.

16) Гропп, Дж., Буттенкоттер, С. и Кеммерер, К. 1978 г. Эстафетная токсичность анаболических агентов. Симп. sur la toxicité de relais, Alfort, 1978. В печати.

17) Herbst, AL Ulfeder, H. & Poskanzer, DC N. Eng. J. Med ., 285, 390. 1971 г.

18) Усиление патологии у сыновей женщин, принимавших СЛП. 1980 г. В сценарии беременности , 455, январь 1980 г .; п. 13.

19) McClung, J. 1980 FDA обнаруживает незаконное использование имплантатов DES у крупного рогатого скота. Корма , 52, 1 и 46.

20) Нельсон, Дж. А., Струк, Р. Ф. и Джеймс, Р. 1980, J. Toxicol. Окружающая среда. Здоровье , 4325.

21) Шараф, А. и Гомаа Н., квал. 1971 г. Завод. Матер. Вег ., 20, 279.

22) ВОЗ. Отчет № 619 за 1979 г., 1978 г., с. 42–43. DES и аденокарцинома. Хроника ВОЗ , 33, 326.

23) Wiggins, JP, Rothenbacher, H., Wilson, LL, Martin, RJ, Wangsness, PJ & Ziegler, JH 1979 J. Anim. наук , 49, 291–297.

24) Абрахам, Г.Э., Рейфман, Э.М., Бастер, Дж.Э., ди Стефано, Дж. и Маршалл, Дж.Р. Аналитик 1972 года . Письма, 5, 479.

25) Allen, E. & Doisy, EA 1923 J. Am. Мед. доц . 81, 819.

26) Astwood, EB 1938 Endocrinology, 23, 25.

27) Bories, GF, Ferrando, R., Woirhaye, J., Peleran, JC & Valette, JP 1977 J. Anim. наук, 44, 680.

28) Эксли, Д. и Даттон, А. Стероиды , 1969, 14, 575.

29) Ferrando, R., Cumont, G., Richou-Bac, L. & Valette, JP 1973 Rec. мед. ветер ., 149, 1319.

30) Ferrando, R., Valette, JP, Le Bars, H. & Brugère, H. 1974 CR Acad. науч. Париж, 278 г. (серия D), 1091 г.

31) Ганс, Дж. и Абрахам, Б. 1980, J. Chromato ., 155, 231.

32) Heinritzi, KH 1974 Thesis, Dr. Vet. Мед., Университет Людвига-Максимилиана, Мюнхен.

33) Heitzman, RJ & Harwood, DJ, 1978 г., Великобритания. Ветер. Дж. , 44, 94.

34) Hoffmann, B. 1972 J. Endocrinol. , 16, 52.

35) Хоффманн, Б. и Карг, Х. 1973 Acta Endocrinol . Доп. 177, 44.

36) Хоффманн, Б. и Оттел, Г. Стероиды, 1976, 27, 509.

37) Hoffmann, B. & Laschuetza, W. 1980 Arch. Lebensmittelhyg . 31, 105.

38) Цзян, Н.С. и Райан, Р.Дж., 1969 г., Mayo Clin. Продолжить. , 44, 461.

39) Kroes, R., Huis, LG, Schuller, PL & Stephany, RW 1976 In Ref. 2, стр. 192–202.

40) Marin, L. 1960 J. Endocrinol . 20, 293.

41) Pottier, J., Busigny, M. & Grandadam, JA 1975 J. Anim. науч. , 41, 962.

42) Richou-Bac, L. & Pantaléon, J. 1978 Trav. чим. питание. гиг . 69, 220.

43) Rombauts, P., Pierdet, A. & Jouquey, A. 1973 CR Acad. науч. Париж, 277 (серия D) 1921.

44) Руитенберг, Э.Дж., Стеренберг, П.А., Брози, Б.Дж.М. и Байс, Дж. 1974 Bull. ВОЗ, ст. 3062.

45) Райан Дж. Дж. и Хоффманн Б., 1978, JAOAC 61, 1274.

46) Schuller, PL & Stephany, RW 1973 CEE, Document 690/VI/72

47) Stob, M., Andrews, FN, Zanow, MN & Beeson, W. 1954 J. Anim. науч. , 13, 138.

48) Соединенные Штаты Америки, Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. 1980 Фед. Регистрация 22 апреля 1980 г., 45 (79) 27014–27016.

49) Verbeke, R. 1979 J. Chromatography, 177, 69.

50) Вербеке Р. 1979 Метод анализа для обнаружения анаболических остатков в тканях убойных животных. СЕЕ, документ 2582/VI/79. Генеральный директор по сельскому хозяйству VI/B/4.

51) Vogt K. & Oehrle, KL 1977 Arch. Lebensmittelhyg . 28, 44.

52) Вальдшмидт, М. 1972, арх. Lebensmittelhyg . 23, 76.

Другие записи этого автора:

• Лютеиновый кистозный механизм
• Что такое Дистоция?
• КЛАССИФИКАЦИЯ ПЛАЦЕНТЫ И ЕЕ ФУНКЦИИ У ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ
• Почему бык не прыгает на корову которая в охоте.
• Почему сексированное семя идеально подходит начинающим животноводам